पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया, इसका सार और आवेदन के क्षेत्र

पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया (पीसीआर) एक विधि हैआणविक जीव विज्ञान, जो कि जैविक पदार्थों में छोटे मात्रा में डीओक्सीरिबोन्यूक्लिक एसिड (डीएनए) का पता लगाने की अनुमति देता है, अधिक सटीक, इसके कुछ टुकड़े हैं, और उन्हें कई गुना बढ़ाना है। वे तब जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा नेत्रहीन पहचानते हैं। प्रतिक्रिया को 1 9 83 में के। मुल्लिस द्वारा विकसित किया गया था और हाल के वर्षों की उत्कृष्ट खोजों की सूची में शामिल किया गया था।

पूरी तकनीक क्षमता पर आधारित हैस्वयं-प्रतिकृति के लिए न्यूक्लिक एसिड, जो कि इस मामले में एक प्रयोगशाला में कृत्रिम रूप से किया जाता है। डीएनए का पुनरुत्पादन अणु के किसी भी क्षेत्र में नहीं शुरू हो सकता है, लेकिन केवल एक विशिष्ट क्रम वाले न्यूक्लियोटाइड के क्षेत्रों में - टुकड़े शुरू करना। शुरू करने के लिए पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया के लिए, प्राइमरों (या डीएनए जांच) की आवश्यकता होती है। ये दिए गए न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम के साथ डीएनए श्रृंखला के छोटे टुकड़े हैं। वे नमूना डीएनए के प्रारंभिक क्षेत्रों में पूरक (अर्थात्, उचित) हैं।

बेशक, प्राइमरों को बनाने के लिए, वैज्ञानिकों को चाहिएप्रक्रिया में भाग लेने वाले न्यूक्लिक एसिड के न्यूक्लियोटाइड के अनुक्रम का अध्ययन करने के लिए यह ये डीएनए जांच है जो प्रतिक्रिया की विशिष्टता सुनिश्चित करता है और इसकी दीक्षा। नमूना में वांछित डीएनए के कम से कम एक अणु नहीं होने पर एक पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन काम नहीं करती। सामान्यतया, उपर्युक्त प्राइमरों, न्यूक्लियोटाइड का एक सेट, प्रतिक्रिया को पूरा करने के लिए एक तापीय स्थिर डीएनए पोलीमरेज़ की आवश्यकता होती है। उत्तरार्द्ध एक एंजाइम है, एक नमूने पर आधारित नए न्यूक्लिक एसिड अणुओं के संश्लेषण के लिए उत्प्रेरक। इन सभी पदार्थों में, जैविक सामग्री जिसमें डीएनए का पता लगाया जा सकता है, को एक प्रतिक्रिया मिश्रण (समाधान) में जोड़ा जाता है। यह एक विशेष थर्मोस्टैट में रखा गया है, इसकी तीव्रता से ताप और एक निर्धारित समय चक्र के लिए शीतलन। आम तौर पर उनमें से 30-50 हैं

यह प्रतिक्रिया कैसे जाती है?

इसकी सार यह है कि एक चक्र के दौरानप्राइमरों डीएनए के वांछित क्षेत्रों से जुड़े होते हैं, जिसके बाद यह एंजाइम की कार्रवाई के तहत युगल हो जाता है। बाद के चक्रों में जिसके परिणामस्वरूप डीएनए किस्में के आधार पर, अणु के नए और नए समान टुकड़े संश्लेषित होते हैं।

पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया लगातार आय होती है,निम्नलिखित चरणों को प्रतिष्ठित किया गया है। सबसे पहले प्रत्येक हीटिंग और शीतलन चक्र के दौरान उत्पाद की मात्रा का दोहराकरण किया जाता है। दूसरे चरण में, प्रतिक्रिया धीमा होती है, क्योंकि एंजाइम क्षतिग्रस्त है, और इसकी गतिविधि भी हार जाती है। इसके अलावा, न्यूक्लियोटाइड और प्राइमरों के शेयरों की कमी है। अंतिम चरण में - पठार - उत्पादों अब संचित नहीं हैं, क्योंकि अभिकर्मक खत्म हो रहे हैं।

जहां यह प्रयोग किया जाता है

निस्संदेह, पोलीमरेज़ का सबसे बड़ा अनुप्रयोगएक श्रृंखला की प्रतिक्रिया दवा और विज्ञान में पाई जाती है यह सामान्य और निजी जीव विज्ञान, पशु चिकित्सा, फार्मेसी और यहां तक ​​कि पारिस्थितिकी में भी प्रयोग किया जाता है। इसके अलावा, बाद में, यह बाहरी वातावरण के भोजन और वस्तुओं की गुणवत्ता पर नजर रखने के लिए किया जाता है। पितृत्व की पुष्टि करने और किसी व्यक्ति की पहचान की पहचान करने के लिए फॉरेंसिक अभ्यास में सक्रिय रूप से पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन का इस्तेमाल किया गया। फोरेंसिक चिकित्सा परीक्षा में, साथ ही पेलियोलॉजी में, यह तकनीक अक्सर एकमात्र तरीका है, क्योंकि आमतौर पर अनुसंधान के लिए बहुत कम मात्रा में डीएनए उपलब्ध है। निस्संदेह, व्यावहारिक चिकित्सा में पाया जाने वाला विधि का एक बहुत व्यापक अनुप्रयोग। आनुवंशिकी, संक्रामक और ऑन्कोलोलॉजिकल रोगों जैसे क्षेत्रों में यह आवश्यक है।